大豆基因转化-武汉贝科新肽公司
受体材料制备选取授粉后10–14天的玉米雌穗,剥离幼嫩籽粒,无菌条件下分离长度1.5–2.0mm的未成熟合子胚,去除胚轴,备用为转化受体。该时期幼胚分生能力,转化与再生效率。3.农杆菌侵染与共培养将制备好的玉米幼胚浸入活化后的农杆菌侵染液,辅以短时离心、负压处理提升侵染效率;吸干多余菌液后,将幼胚置于共培养基上,22–25℃避光暗培养2–3天,实现T-DNA的转移与整合。载体构建与菌株活化根据实验需求构建植物表达载体,将目的基因、特异性启动子、终止子、抗性筛选标记(潮抗性、草铵抗性为水稻常用筛选标记)插入二元载体T-DNA区域,测序验证序列无误后,将重组载体导入EHA105等农杆菌感受态细胞,筛选阳性单菌落,大豆基因转化,活化备用。2.水稻愈伤组织诱导选取饱满无破损的水稻成熟种子,去除外壳,经过酒精、次梯度无菌消毒后,接种于愈伤诱导培养基。26–28℃避光暗培养2–3周,诱导种子盾片产生淡黄色、颗粒状、致密的胚性愈伤组织,剔除褐化、水渍化的无效愈伤,挑选胚性愈伤作为转化受体。水稻作为模式单子叶作物,相较于玉米,组织培养再生体系更成熟、基因型依赖性更弱,多数常规水稻品种均可实现转化,是植物基因工程研究的模式作物,技术重复性与稳定性更强。二、主流水稻基因转化方法目前水稻科研与规模化育种中,农杆菌介导法为主流方法,基因轰击法、PEG介导法、花粉管通道法为辅助转化方法,不同技术适配不同实验场景、受体材料与育种需求。(一)农杆菌介导转化法(主流)该方法是当前水稻育种、基因功能研究的技术,具有整合拷贝数低、遗传稳定、操作简便、成本低廉、转化等优势,适配绝大多数水稻籼稻、粳稻品种。大豆基因转化-武汉贝科新肽公司由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司在化学试剂这一领域倾注了诸多的热忱和热情,贝科新肽一直以客户为中心、为客户创造价值的理念、以品质、服务来赢得市场,衷心希望能与社会各界合作,共创成功,共创辉煌。相关业务欢迎垂询,联系人:夏先生。)