基因组原位杂交技术基因组原位杂交(Genomeinsituhybridization，GISH)技术是20世纪80年代末发展起来的一种原位杂交技术。它主要是利用物种之间DNA同源性的差异，用另一物种的基因组DNA以适当的浓度作封阻，在靶染色体上进行原位杂交。GISH技术初应用于动物方面的研究(Pinkeletal.，1986)，在植物上早应用于小麦和栽培种的鉴定(余舜武等2001；王文奎等2000)。原位杂交杂交液（一）杂交液内除含一定浓度的标记探针外，还含有较高浓度的盐类、甲酰胺、硫酸葡聚糖、牛白蛋白及载体DNA或RNA等。（二）杂交液中含有较高浓度的Na+可使杂交率增加，荧光原位杂交技术，可以减低探针与组织标本之间的静电结合。（三）贾酰胺可使杂交温度降低，所以杂交液中加入适量的甲酰胺，可避免因杂交温度过高而引起的组织形态结构的破坏以及标本的脱落。（四）硫酸葡聚糖能与水结合，从而减少杂交液的有效容积，提高探针有效浓度，以达到提高杂交率的目的。一.原位杂交天1.重新水化和固定1）吸取固定好的胚胎，加入50%的PBST溶液，放置5分钟。2）置换成30％的PBST溶液，放置5分钟3）置换成PBST溶液，放置5分钟，重复一次4）置换成4％多聚甲醛的PBS溶液固定20分钟5）用PBST洗两次，每次放置五分钟，室温。蛋白酶处理与后固定（本实验不做此步）1）用10ul/ml的蛋白酶K在室温下处理胚胎。5体节以下的胚胎不处理，5体节到24小时的胚胎处理3分钟，24小时以上的胚胎处理5分钟或者更长。发育时间越短的胚胎越嫩，可以不用或者少用蛋白酶处理，发育时间长的胚胎就需要用蛋白酶来疏松组织，以便于杂交。2）用PBST溶液轻洗，在PBST中放置5分钟。3）用4％多聚甲醛的PBS溶液固定20分钟，室温。4）用PBST洗两次，每次放置五分钟，室温。武汉荧光原位杂交技术-贝科新肽由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司位于湖北省武汉市洪山区关山大道289号紫菘逸景华庭二期109栋2层2002-3号。在市场经济的浪潮中拼博和发展，目前贝科新肽在化学试剂中享有良好的声誉。贝科新肽取得全网商盟认证，标志着我们的服务和管理水平达到了一个新的高度。贝科新肽全体员工愿与各界有识之士共同发展，共创美好未来。)