原位杂交第三天1）用1ml含10%热灭清的MABT溶液置换溶液，放置摇床上25分钟，然后用1mlMABT置换，25分钟，再用1mlMABT溶液置换，一小时以上，后用1mlMABT溶液置换，25分钟。2）用1ml1mM左旋米睉的Stainingbuffer洗三次，每次放置五分钟。3）将胚胎转入十六孔板中，吸去stainingbuffer，加上300ulBMPurpleAPSubstrate（底物，用之前加5mM左旋米唑），十六孔板外面包上锡箔纸以避光，避免摇动，室温下显色。4）每隔一小时观察胚胎是否开始显色5）将显色完全的胚胎中的底物吸出，用PBST洗两三次后加上4%多聚甲醛固定，拍照。6）4C冰箱保存。原位末端凋亡检测（Tunel）实验原理：TUNEL技术可对组织或细胞中凋亡小体或单个凋亡细胞进行染色，能准确反映细胞凋亡典型的生物化学和形态特征。凋亡细胞内内源性核酸内切酶被而将自身染色体DNA切断成缺口或3-OH末端片段这一特点，利用脱氧核苷酸末端转移酶将标有标记物(如，植物染色体原位杂交测试服务，生物素或荧光素)的脱氧核苷酸转移到3-OH末端，再用组化法或荧光检测凋亡细胞。点对点酵母双杂交验证实验流程1、诱饵蛋白毒性及自激1活检测；2、共转化：分别将诱饵/捕获质粒（pGBKT7-Bait/pGADT7-Prey）、阳性对照质粒（pGBKT7-p53/pGADT7-T）、阴性对照质粒（pGBKT7-Lam/pGADT7-T）分别共转到Y2HGold感受态细胞中，涂布于DDO平板培养；3、点板验证：分别从平板上挑单克1隆稀释10倍、100倍、1000倍，然后点板到TDO/X/A和QDO/X/A固体培养基进行验证；4、实验数据与报告整理。植物染色体原位杂交测试服务-科锐诺由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司为客户提供“外泌体,透射电镜,扫描电镜,石蜡切片等技术服务”等业务，公司拥有“科锐诺”等品牌，专注于技术合作等行业。，在湖北省武汉市江夏区神墩四路666号武汉国英种子A栋1楼的名声不错。欢迎来电垂询，联系人：王经理。)