GFP是绿色荧光蛋白，在扫描共聚焦显微镜的激光照射下会发出绿色荧光，从而可以地定位蛋白质的位置。绿色萤光蛋白（GFP）是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质，从蓝光到紫外线都能使其激发，发出绿色荧光。通过基因工程技术，绿色萤光蛋白(GFP)基因能转进不同物种的基因组，在后代中持续表达，并且能根据启动子特异性地表达。使用GFP必须构建融合蛋白载体，蛋白互作，并在转染之后有效表达。这样，若在荧光显微镜下看到细胞内某一部位存在GFP信号，说明和GFP融合的蛋白也存在于该部位，这样就达到了确定某物质亚细胞定位的目的。基因法转化洋葱表皮细胞：分别用70%乙醇和灭菌蒸馏水清洗金粉（直径为1μm），加入灭菌蒸馏水制成金粉悬浮液，取100μL放在含有1.0cm2洋葱表皮的玻璃皿中，边振荡边加入10μLpCambia2301-GaMYB2-GFP质粒，逐步加入40μL0.1mol·L-1亚精胺和100μL2.5mol·L-1CaCl2，振荡混匀。基因GDS-80轰击时氦气罐的气压为1300psi，取10μLDNA包裹好的微粒悬浮液加到基因中央，进行轰击，之后放置25℃避光过夜培养，使用ConfocalLaser激光共聚焦显微镜观察。为什么要提供GFP空载的对照图片？（1）作为整个实验过程中的操作参照，可排除因实验操作而导致目的基因没有荧光信号的影响。（2）作为载体体系的参照，确认构建载体时所使用的载体是可正常表达荧光蛋白的。拍摄时为什么有明场通道？（1）显示细胞状态，有活力的细胞应该有正确且明显的细胞形态，变形或破碎的细胞说明此时细胞不是适状态或细胞已。（2）显示荧光确实是细胞内蛋白表达的，而不是细胞碎片及杂质产生的杂光。湖北蛋白互作-武汉贝科新肽公司(图)由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司为客户提供“原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选”等业务，公司拥有“原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选”等品牌，专注于化学试剂等行业。，在湖北省武汉市洪山区关山大道289号紫菘逸景华庭二期109栋2层2002-3号的名声不错。欢迎来电垂询，联系人：夏先生。)