外泌体miRNA测序测试服务-武汉科锐诺生物(图)
iTRAQ(isobarictagsforrelativeandabsolutequantitation,同位素标记相对和绝1对定量)是由ABSCIEX公司研发的一种体外同重同位素标记的相对与绝1对定量技术。该技术使用8种(或4种)不同的同位素试剂来同时标记和比较8种(或4种)不同的蛋白质样品。这些试剂由3个不同的化学标签组成:报告部分,肽反应部分和平衡部分。报告部分为客户可按需选择标记个数,肽反应基团将iTRAQ标签与肽段的N-端基团和每个赖氨酸侧链相连,可标记所有酶解肽段,平衡部位可保证iTRAQ试剂标记的不同样本的同一肽段具有相同的质荷比,因此改变任一iTRAQ试剂,外泌体miRNA测序测试服务,不同同位素在标记同一多肽后在一级质谱检测,分子量都完全相同。而在串联质谱中,同重元素标记肽段平衡基团在二级质谱发生中性丢失。信号离子表现为不同质荷比的峰,因此,根据波峰的高度及面积,可以得到蛋白质的定量信息。外泌体是由细胞分泌的纳米级膜性小囊泡,直径约30~150nm。外泌体来源多样,广泛存在并分布于各种生物液体中,富含来源细胞的蛋白质、脂质和核酸,参与细胞间的信息交流。不同病理和生理条件下,外泌体的内容物不尽相同,因此外泌体可以很好地反映生物体的疾病与健康状态。此外,外泌体特殊的膜结构能够保护其内容物如RNA(microRNA、mRNA、lncRNA、circRNA)免受酶的降解,保证其能在各类体液中被稳定检测到,因此外泌体是研究各种疾病的良好生物学材料,可作为肿1瘤潜在的biomarker和治1疗靶点,亦可作为基因/药1物的递送载体,在疾病的诊断和治1疗方面具有广阔的应用前景。外泌体研究开展的如火如荼。不论是SCI文章的发表还是各类基1金的申请,外泌体相关研究表现都非常亮眼。外泌体提取后,研究人员面临的一个重要问题就是,我提取的是不是外泌体?如果是的话,质量如何?现阶段,对外泌体进行鉴定主要有三种主流的方法:电镜、粒径和Westernblot分析靶标物。之前我们已经对外泌体电镜进行了总结,今天我们来看看外泌体的粒径分析。外泌体粒径分析原理外泌体粒径分析方法为纳米颗粒跟踪分析(NanoparticletrackingAnalysis,NTA),其原理是对每个颗粒的布朗运动进行追1踪和分析,结合Stockes-Einstein方程式计算出纳米颗粒的流体力学直径和浓度。NTA技术已被外泌体研究领域认可为外泌体表征手段之一。相较于其他表征方式,NTA技术的样本处理更简单、更能保证外泌体原始状态、检测速度更快。外泌体miRNA测序测试服务-武汉科锐诺生物(图)由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司是湖北武汉,技术合作的见证者,多年来,公司贯彻执行科学管理、创新发展、诚实守信的方针,满足客户需求。在科锐诺领导携全体员工热情欢迎各界人士垂询洽谈,共创科锐诺更加美好的未来。)