外泌体分离提取方案。主要方案包括：1、差速超1速离心法；适用于细胞上清、灌洗液、尿液等大体积的样品；2、基于PEG沉淀原理的试剂盒法；适用于血1清、脑脊液等小体积的样品；3、超滤提取法；适用于细菌培养液或外泌体含量较低的样品浓缩。亦可搭配超1速离心法，做进一步的提取。外泌体是细胞外囊泡的一种，其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似，电镜下，显示出典型的茶托状超微结构。实际操作中，通过常规的单一的方法很难鉴定外泌体。鉴定外泌体需要包含形态、粒径、表面分子标记物等多方面的鉴定。具体方法包括：透射电镜（形态鉴定）、NTA检测（粒径及浓度鉴定）、WB（分子标志物）。NTA检测作为外泌体鉴定的经典方法之一，可同时反映出检测样品的浓度及粒径。质量较好，纯度较高的外泌体样品，粒径分布在30-150nm，原液浓度在10^9左右。为了保证检测质量，对每一个样品，都会进行3次技术重复。检测周期为2-3个工作日，可当天到样当天出结果。据国际细胞外囊泡学会（ISEV）在2014年的提议，外泌体miRNA测序检测，外泌体鉴定3个标志：透射电镜（transmissionelectronmicroscope，TEM）、粒径（NanoparticleTrackingAnalysis，NTA）、蛋白标志物（WesternBlot，WB）。外泌体透射电镜TEM鉴定外泌体大小、形态，判断样本是否含有外泌体。外泌体透射电镜分辨率为0.1~0.2nm，适合外泌体双层囊膜超微结构观察，可观测样本中是否存在外泌体样结构（通常为茶托型或一侧凹陷的半球形），同时可测量外泌体大小。检测平台：TecnaiTMG2SpiritBioTWIN检测结果：三张透射电镜图片，尽可能体现完整的外泌体形态（如有）检测周期：10-15个工作日抗原提呈中外泌体的作用树突状细胞是免1疫系统中分泌外泌体活跃的细胞。树突状细胞是抗原提呈细胞的一种，能通过吞噬入1侵体内的细菌等异物，在切断抗原肽后，与MHCⅡ类分子结合并提呈在细胞表面来激1活T细胞。细胞内的抗原肽利用MHCⅠ类分子提呈，树突状细胞分泌的外泌体携带MHCⅠ类和Ⅱ类分子，它们分别与抗原特异性CD8+细胞杀伤性T细胞、CD4+辅助T细胞的T细胞受体结合，在远离树突状细胞处也可以激1活T细胞。外泌体miRNA测序检测-武汉科锐诺生物(图)由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司在技术合作这一领域倾注了诸多的热忱和热情，科锐诺一直以客户为中心、为客户创造价值的理念、以品质、服务来赢得市场，衷心希望能与社会各界合作，共创成功，共创辉煌。相关业务欢迎垂询，联系人：王经理。)